将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应.其优点是方法简便、性高,非性荧光染色少.缺点是性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体.此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查....

(1)绵羊红细胞(sheepredbloodcell,SRBC) 自绵羊颈静脉采血,注入装有等量或二倍量阿氏(Alsever)液的无菌三角烧瓶中,轻摇3-5min,分装,4℃保存,可用2-3周左右.试验时,取一定量的SRBC用生理盐水洗涤3次,最后1次洗涤离心的条件每次试验要保持一致.试验时一般配成1×109SRBC/ml.为使每次试验时SRBC的浓度标准化,可根据经细胞计数器校准的浓度为1×109SRBC/ml的细胞悬液,用分光光度计测定其OD541nm值,以后每次试验均参照此OD值校正 SRBC浓度;...

　　脊神经节是脊髓两侧的脊神经背根上的膨大组织,属感觉神经节,内含许多假单极神经元胞体和平行排列的神经纤维束.神经元胞体(节细胞)呈圆形或卵圆形,大小不等,大的染色浅,小的染色深.胞核圆形,位于胞体中央,核仁明显.节细胞周围可见一层扁平或立方形的卫星细胞,其核圆或卵圆形,染色较浅,胞质不明显....

　　抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫性的球蛋白。在免疫学实践，为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后，动物血清中可以产生大量的性抗体。这种含有性抗体的血清称为免疫血清。免疫血清不但对传染病的诊断、预防和治疗有重要意义，而且对，肿瘤以及某些科研工作也有重要意义。...

甲型肝炎病毒(HAV)属于微小核糖核酸病毒,归类为picorno病毒科肠道病毒属第?2型.HAV含有单股线性RNA基因组,长度约为8 100bp,沉降系数为33—35s.HAV的增殖部位主要在肝细胞的胞浆内,并通过胆汁从粪便排出体外.目前,甲型肝炎病毒的临床常规检测项目主要是检查血清中HAVAb-IgM和HAVAb-IgG....

　　组织型激肽酶基因家族Kallikrein(klk)编码一组具有丝氨酸蛋白酶活性的组织型激肽酶(hK).klk6是klk之一,其编码蛋白被命名为hK6.研究表明,hK6广泛存在人体组织和体液中,而组化法发现hK6在卵巢癌组织中表达增高,可作为卵巢癌的一个诊断指标....

　　单克隆抗体的生产既可采用动物体作为生物反应器进行生产,又可采用人工生物反应器培养杂交瘤细胞进行生产,前者可通过诱发实体瘤及腹水瘤,从腹水中提取,也可采用牛淋巴液体外循环,从培养上清中提取McAb,后者在体外大量培养杂交瘤细胞,常采用旋转培养法,中空纤维培养法,悬浮搅拌培养法等....

　　克伦特罗(Clenbuterol)属于beta兴奋剂,是一种高选择性的兴奋剂和激素,具有水解脂肪、合成代谢和对非条纹肌肉组织的松弛作用.进年来被一些人非法添加到饲料中以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物的生长.当用作生长调节剂时,其添加量是治疗量的5—10倍,常在动物体内残留而给消费者带来危害....

　　大多数蛋白质溶液可与样品缓冲液混合并直接用于免疫印迹.下述方法可用于细胞去污剂裂解液,柱层析洗脱液和大多数其他来源的抗原样品....

a -smooth muscle actin 是一种具有收缩能力的微丝蛋白,a-SMA广泛分布于几乎所有的肌型细胞中.目前α-SMA抗体被广泛用于纤维化组织的病理学研究中....

1. 1.5%琼脂的配制：pH 7.4的PBS 100mL中加1.5克琼脂，微波炉中小功率加热，使琼脂完全溶化。...

　　很多组织都可以用来进行免疫组化来检测NiV的抗原.用纯化的NiV免疫兔而制备的兔抗血清和一些单克隆抗体进行免疫组化检测NiV性抗原.酶标第二抗体选用碱性磷酸酶标记的抗兔或者抗鼠的抗体....

　　各种血液细胞及血管内皮细胞受到刺激而活化或发生凋亡后,细胞膜磷脂酰丝氨酸由胞膜内层进入外层,以出芽方式形成小泡状结构而脱落,形成所谓的“微粒(microparticle,MP)”.正体血液中即存在少量MP,而在许多疾病中MP水平明显升高.MP具有促进血液凝固反应发生与血栓形成等多种重要生物学活性.越来越多的研究提示,检测血液MP水平与性质有助于监测病情、指导治疗与疗效判断....

　　抗体具有严密的三维结构,已进化成为在大多数生物中,甚至机体大面积创伤时也能保持其活性.抗体紧凑的三维结构使抗体能抵御轻度变性的,从而也使抗体的长期存放较为容易.通常需要将甘油或其他稳定剂加到储存的缓冲剂中,以保持实验室中纯化的蛋白活性....

ELISA 是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种性很高的试验技术.免疫酶技术是将酶标记在抗体/抗原上,形成酶标抗体/酶标抗原,称为酶结合物.该酶结合物的酶在免疫反应后,作用于底物使之呈色,根据颜色的有无和深浅,定位或定量抗原/抗体.ELISA 法是免疫酶技术的一种,其特点是利用聚苯乙烯微量反应板(或球)吸附抗原/抗体,使之固相化,免疫反应和酶促反应都在其中进行.在每次反应后都要反复洗涤,这既了反应的定量关系,也避免了末反应的游离抗体/抗原的分离步骤.在ELIS...

　　本实验介绍了兔红细胞玫瑰花环试验操作流程。玫瑰花环试验，又称为花结试验。是测定淋巴细胞数量和功能的一种方法。...

　　(3)我的阳性对照采用的是阳性组织切片,阴性对照则分别是rabitt和rat的IgG,荧光标记物对照是PBS+荧光标记物....

　　检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,在同一个抗体公司,可能会有好几种,甚至好几十种;在不同的抗体公司,那就更多了.那怎样在琳琅满目的抗体中,选择自己实验需要的抗体呢?...

在临床实验室,对试剂的准备一般不太注意,通常的做法是在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性.因此,在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20～30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求....

　　胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术.由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确.因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术.现已广泛应用于电镜、流式细胞仪、免疫印迹、蛋白染色、体外诊断试剂的制造等领域....

免疫酶法是借助酶细胞化学等手段显示组织抗原(或抗体)的新技术,是在免疫荧光法的基础上发展起来的.免疫酶法的基本原理与免疫荧光法有所相似,免疫酶法是将酶以共价键的形式结合在抗体上,制成酶标抗体,再借助酶对底物的催化作用,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,于光镜或电镜下进行细胞表面或细胞内部各种抗原成分的定位.已如前述,免疫荧光法具有操作简便、灵敏、性高、省时的优势,但同时也具有令人遗憾的不足,特别是荧光标 本不能长期保存以及需要价格昂贵的荧光显微镜才能观察的问题.为此,Nakane等人(1966...

　　20世纪70年代后期在免疫酶技术中利用生物素-亲和素系统(biotin-avidinsystem,BAS)标记抗体发展了又一种新型生物反应放大技术,即BAS-ELISA技术,它使用生物素-亲和素-过氧化物酶复合物作为剂,组成一新的生物放大系统进一步提高检测的度.生物素(biotin)是广泛分布于动植物体内的一种生长因子,又称辅酶R或维生素H.亲和素(avidin)是卵白及某些微生物中的一种蛋白质,由4个亚单位组成.二者有高度亲和力,且均能偶联抗体、抗原和辣根过氧化物酶而不影响其生物学活性....

① 异硫氰酸荧光素(fluorecein isothiocyante,FITC),为、橙或褐结晶粉末,有两种异构体,易溶于水和酒精等溶剂.量为389,最大吸收光谱为490～495,最大发射光谱为520～530urn,呈现明亮的黄绿色荧光,是最常用的标记抗体的荧光素....

　　细菌或病毒灭活疫苗是细菌、病毒或立克次氏体的培养物,经化学或物理方法灭活制成,便之完全对原来靶器官的致病力,而仍保存相应抗原的免疫原性,如甲肝疫苗等.类毒素是由细菌在液体培养条件下,产生外毒素,经脱毒提纯工艺制成....

　　血清中有免疫复合物存在时,可与其本身的C1(内源性C1)结合.将被检血清56℃加热1h,能结合的C1,空出补体结合位点.当加入豚鼠血清(外源性C1)及系统(致敏SRBC)时,CIC又可与外源性C1结合,使致敏SRBC的溶血被....

　　免疫荧光组织(细胞)化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物上带有荧光素,在荧光显微镜下,由于受紫外光照射,荧光素发出明亮的荧光,这样就可以分辨出抗原(或抗体)的所在及其性质,并可利用荧光定量技术计算抗原的含量,以达到对抗原物质定位、定性、半定量测定的目的....

免疫后4天，测量左后足跖部厚度，然后在测量部位皮下注射20%(v/v)SRBC，每只鼠20μL(约1×108个 SRBC)，注射后于24h测量左后足跖部厚度，同一部位测量三次，取平均值。...

　　标记抗原应具备:①比放射性高,以方法的灵敏度;②免疫活性好;③所用的核素的半衰期尽可能长,标记一次可较长时间使用,这对来之不易的抗原尤其重要;④标记简便、易防护....

3.确定蛋白质包被的最佳浓度:将蛋白质作连续10倍稀释各1ml,加入5ml胶体金溶液,1分钟后加入1ml 10%氯化钠溶液,静止5分钟;以胶体金溶液为空白对照测定光吸收度,选择最低吸收值的蛋白质浓度用于正式包被....

[/strong] 电化学发光免疫测定(Electrochemiluminescence immunoassay,ECLI).ECLI 是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫测定以后的新一代标记免疫测定技术.电化学发光法源于电化和化学发光法,而ECLI 是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物,是一种在电极表面由电化学引发的性化学发光反应,包括了电化学和化学发光二个过程.ECL 不仅可以应用于所有的免疫测定,而且还可用于DNA/RNA探针检测....