免疫细胞检测技术：染色体免疫共沉淀protocol
1. 准备好一盘细胞量达到1 x 106的培养皿(注意:培养细胞时要适当处理细胞使得目的基因处于被的状态)...
免疫检测分析：金磁免疫层析快速检测技术
免疫层析法 (Immunochromatography)是九十年代兴起的一种基于免疫胶体金技术的快速诊断技术，实质上是蛋白质等高被吸附到纳米金颗粒表面的包被过程。...
免疫组化：苏木精-伊红染色（HE染色）
HE染色是一种以形态为基础,结合应用化学技术对组织、各种细胞进行染色的实验技术,用于研究组织细胞的生理、病理和化学结构....
基础免疫实验：补体C3 含量测定
C3的增多与减少基本与总补体活性所述相似,但更为.在机体组织损伤和急性炎症时,常增高或为正常,如菌血症、肺炎、扁桃腺炎、结核、伤寒、麻疹、等;肿瘤患者,尤以肝癌,血清C3含量升高更为显著,但胰腺癌晚期与隐性淋巴细胞白血病则呈降低趋势....
免疫细胞检测技术：靶细胞杀伤实验：LDH法
[/strong]按表1加样于96孔培养板中,设3个复孔.混匀置二氧化碳培养箱中孵育4h.室温离心,用微量加样器每孔取上清液100μl,送全自动生化分析仪测定每孔的LDH含量....
科学家记忆性B细胞抗原受体基底水平信号的机制
记忆性免疫应答在机体抵御病原体的过程中发挥着重要作用，记忆性B淋巴细胞为其重要组成部分，同时也是几乎所有现行疫苗发挥作用的免疫学基础。静息态的记忆性B细胞存在基底信号转导，其中关键抗原受体IgG-BCR有低水平的酪氨酸磷酸化，可能介导了细胞的存活。目前IgG-BCR本底磷酸化的机制并不清楚。该论文通过开发新颖的液体核磁共振技术，研究了IgG-BCR的结构动态性，为本底磷酸化提供了结构上的解释。...
基础免疫实验：间接炭凝反应原理及方法
间接炭凝集反应简称炭凝.它是以炭粉微粒作为载体,将已知的抗体球蛋白吸附于这种载体上,形成炭粉抗体复合物,当炭血清与相应的抗原相遇时,二者发生性结合,形成可见的炭微粒凝集块....
免疫检测分析：ELISA检测肺炎支原体抗体IgM
取新鲜末梢血或静脉血.如采血后24h内不能进行试验,分离血清后将其保存于一20℃中.检测时,使样本恢复至室温....
免疫细胞检测技术：流式检测细胞内游离钙离子
Fluo-3-Am为一新型的高度性Ca2+荧光剂,可以灵敏地反映细胞内游离钙离子浓度的变化,Fluo-3-Am进入细胞后经非性酯酶脱去Am酯,成为脂溶的Fluo-3留在细胞内,当Fluo-3与细胞内游离钙结合后,其荧光强度是Fluo-3本身的40倍以上,当用480nm波长激发时,其荧光强度与游离钙离子浓度成正比....
免疫检测分析：免疫共沉淀,染色质免疫沉淀在实验操作中所要注意的关键点的主要区别
免疫共沉淀的目的是通过抗体和目的蛋白的相互作用从而捕获目的蛋白复合物,最终检测目的蛋白复合物中各成分之间的相互作用.所以实验中要注意的关键点和免疫沉淀相比,除了要注意抗体和目的蛋白相互作用的效果外,还要注意目的蛋白复合物的完整性.后者主要考虑因素是缓冲液中的去垢剂成分能否在有效目的蛋白复合物进入可溶相的情况下不目的蛋白复合物中各成分之间的相互作用.所以,免疫共沉淀实验中的关键因素除了抗体的选择外,裂解缓冲液配方中的去垢剂的成分和浓度对免疫共沉淀实验的成功与否至关重要,其选择相比免疫沉淀实验而言,要求更...
免疫检测分析：机体的天然免疫机制-正常血清的杀菌作用
机体的天然免疫机构对消灭侵入的微生物具有重要的作用。如皮肤与黏膜是抵抗外来侵害的第一道屏障。皮肤具有机械的作用，黏膜可分泌许多液体，如泪液、唾液、胃液、肠液等，其中喊含有溶菌酶，可溶解和细菌。正好血清中也含有许多杀菌的因素，如补体。乙型溶菌素及备解素系统等，可革兰氏阴性或阳性细菌。血液中的白血球及巨噬细胞对外来异物有及消化的作用，这种作用也是天然防御中的重要机制之一。...
《自然—免疫学》：曹雪涛提出抗病毒天然免疫表观调控新机制
干扰素在机体抗病毒天然免疫应答中发挥关键性的作用。在病毒感染过程中，干扰素产生的多少与持续时间受到精确调控，以确保机体清除入侵病毒的同时能避免病自身免疫损伤。目前关于干扰素表达精确调控的机制研究主要集中在天然免疫信号通蛋白，而以细胞核内RNA修饰的方式调控干扰素表达的机制尚不清楚。...
ELISA：ELISPOT (Enzyme-linked ImmunoSPOT)
抗体的生物素化标记可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合.其后,生物素化的可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测.小的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础....
抗体抗原实验：抗体的生物素化标记Ⅱ
抗体的生物素化标记可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合.其后,生物素化的可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测.小的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础....
Science：华人团队解决异种难题
上世纪90年代，医学研究者们曾尝试解决这一问题。他们给出的策略是异种移植，即在人体内移植入动物器官。在这些动物中，猪的器官在尺寸与功能上和人体器官较为接近，因此也获得了研究人员的关注。然而，猪的基因组里含有内源性逆病毒（PERV）的序列，对人体有潜在的健康风险。直接将猪的入人体，可能会导致新型疾病的。几十年里，科学家们也一直在试图解决这个难题。...
免疫检测分析：免疫共沉淀实验方法
(3)必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性....
免疫细胞检测技术：PCR-ELISA端粒酶检测法
端粒是真核生物染色体末端的DNA-蛋白结构,端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列,这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列为TTAGGG).已确认端粒在基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合(如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失)中起重要作用....
免疫检测分析：ELISA竞争法普遍存在的操作问题
第二军医大学长海医院对此造成的影响进行了研究.将阴性标本94份并用生理盐水进行1:30稀释,在加入标本后按下表时间放置后再加入酶标抗体,然后检测结果如下:...
ELISA：ELISA方法的基本类型、用途及操作程序Ⅰ
酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA):是酶免疫测定技术中应用最广的技术.其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 )表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除.常用的ELISA法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大抗原,后者用于测定抗体....
ELISA：大鼠TNF-B酶联免疫分析ELISA
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中TNF-B水平.用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入TNF-B、生物素化的抗TNF-B抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色.TMB在过氧化物酶的催化下成蓝色,并在酸的作用下成最终的.颜色的深浅和样品中的TNF-B呈正相关.用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度....
免疫荧光：组织切片制备及染色技术
(1)取材与固定：切取组织时应使用锋利的刀、剪,切取组织块时,从刀的根部开始向后拉动切开组织.组织块的厚度约为0.2~0.3cm,大小为1.5cm x 1.5cm x 0.3cm为宜.取好的组织块用10%福尔马林溶液固定24~48h....
抗体抗原实验：杂交瘤细胞的制备
4、在脾中部切开一小口,用注射器芯从一端轻轻压挤,再用无血清培养液冲洗,令细胞通过纱网,收集入平皿中,或用注射器向脾脏内注入3 ml无血清培养液,反复抽吸数次方法获取细胞,再制成细胞悬液亦可....
基础免疫实验：现代免疫学研究进展概况(90年代至今的研究进展)
人类基因组计划(human genome project, HGP),1985年由美国科学家提出,于1990年正式启动.我国于1994年在陈竺、杨焕明等著名学者的下启动了HGP, 参与测序区域占人类整个基因组的1%....
免疫细胞检测技术：免疫磁珠分选细胞的操作步骤和注意事项
2.用20倍体积PBE洗细胞一次,再加PBE(0.3ml/1×108细胞)充分混悬细胞后,加入相应二抗包被的超微磁珠,混匀后置8~15℃孵育10~15分钟....
免疫检测分析：免疫组化DAB法 显示过氧化物酶
16. 除去,DAB显色10′(在显微镜下观察染色程度控制染色时间).蒸馏水冲洗....
抗体抗原实验：人用单克隆抗体质量控制技术指导原则
SP2/0或其他适宜的骨髓瘤细胞系.应为不合成或不分泌免疫球蛋白链型,具有符合骨髓瘤细胞的染色体特征,并有明确的来源历史及符合要求的保存条件....
基础免疫实验：间接凝集反应原理及分类
载体的存在使反应的性得以大大提高.间接凝集反应的优点为:①性强:间接凝集反应是最性的血清学反应方法之一,可以检测到微量的抗体和抗原;②快速:一般1h～2h即可判定结果,若在玻板上进行,则只需几分钟;③性强;④使用方便、简单....
抗体抗原实验：多克隆抗体的免疫电泳
免疫电泳又称为或免疫球蛋白电泳技术，这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM，IgG，IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中，首先利用蛋白质的量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离，然后将性的抗体引入到与电泳方向平行的凹槽中，在抗原和抗体的扩散过程中，抗原和抗体适当比例的结合会导致沉淀的产生。0.85%盐不仅可以终止扩散过程也可用于洗去未结合的蛋白，抗原和抗体结合所形成的沉淀线即可以观察也可利用染色方法观察。...
免疫细胞检测技术：细胞凋亡的三种流式检测方法
细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间.利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞....
免疫检测分析：均相酶免疫测定
均相酶免疫测定是将半抗原或小抗原如药物、激素、毒品、兴奋剂等与酶结合制成酶标记物,酶与抗原(半抗原)结合后仍保留酶和抗原(半抗原)的活性.测定时将待测样品、酶标记物、性抗体和底物溶液加在一起,待抗原—抗体和酶底物反应平衡后,即可直接测定结果,无需分离步骤,整个检测过程都在均匀的液相内进行.依据实验原理可分为竞争结和非竞争结两种类型....