蛋白质修饰:蛋白质二级结构预测-综合各种分析方法预测
就像α螺旋和β折叠片的可以预测出来一样,其它特定的结构或结构特征,如卷曲螺旋和跨膜区也可以预测出来.但这类预测的方法没有二级结构预测方法多,主要是由于这些结构或结构特征的折叠规律尚不十分清楚.尽管如此,若待预测序列在已知结构数据库中能搜索到相似蛋白,则可以提高预测的准确性....
蛋白质含量测定:BCA蛋白质定量检测
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2D电泳技术:双向电泳样品缓冲液选用的基本原则
3.2 硫尿:与尿素一起,能增加疏水膜蛋白的溶解性,缺点是在平衡液里与蛋白的半胱氨酸竞争结合碘代乙酰胺,会使蛋白的烷基化不完全,硫尿还有SDS与蛋白质结合的作用,也可能增加脂类的溶解性,影响二向的效果.一般是2mol/L的硫尿与5-7mol/L尿素结合使用....
SDS-PAGE:等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点
蛋白质是典型的两性电解质.它在大于其等电点的pH中解离成带负电荷的阴离子,向电场的正极泳动,在小于其等电点的pH中解离成带正由荷的阳离子,向电场的负极泳动.这种泳动只有在等于其等电点的pH中,即蛋白质所带的净电荷为零时才能停止.如果在一个有pH梯度的中,对各种不同等电点的蛋白质混合样品进行电泳,则在电场作用下,不管这些蛋白质的原始分布如何,各种蛋白质将按照它们各自的等电点大小在pH梯度中相对应的处进行聚焦,经过一定时间的电泳以后,不同等电点的蛋白质便分别聚焦于不同的.这种按等电点的大小,生物在pH梯度...
蛋白质修饰:蛋白质结构预测的思想及相关数据库
理论分析方法或从头算方法(Abinitio):通过理论计算(如力学、动力学计算)进行结构预测,该类方法假设折叠后的蛋白质取能量最低的构象.从原则上来说,我们可以根据物理、化学原理,通过计算来进行结构预测.但是在实际中,这种方法往往不适合.主要有几个原因,一是自然的蛋白质结构和未折叠的蛋白质结构,两者之间的能量差非常小(1kcal/mol数量级),二是蛋白质可能的构象空间庞大,针对蛋白质折叠的计算量非常大.另外,计算模型中力场参数的不准确性也是一个问题....
蛋白质含量测定:蛋白质定量分析
一般样本:1) 通常由色析法所收集到的各分划样本,都可以直接进行蛋白质定量分析;但若其中含有某些干扰因子(如含有Triton),或样本的浓度太浓,都必须将样本稀释后再测.2)同一样本的若干不同稀释浓度,所测出来的最终蛋白质浓度会有差异,通常是以稀释度大者较为准确....
蛋白质含量测定:高效液相色谱之高效排阻液相色谱
1、HPLC分离、纯化蛋白质的速度快。通常半小时左右可进行一次,大大缩短了纯化蛋白质的时间;...
SDS-PAGE:SDS-PAGE原理及蛋白质定量
SDS是一种阴离子去污剂,它能蛋白质之间以及其它物质之间的非共价键.在强还原剂如巯基乙醇或二硫苏糖醇的存在下,蛋白质内的二硫键被打开并解聚成多肽链.解聚后的蛋白质与SDS充分结合形成带负电荷的蛋白质-SDS复合物,复合物所带的负电荷大大超过了蛋白质原有的电荷 量,这就消除了不同蛋白质之间原有的电荷差异,蛋白质-SDS复合物在溶液中的形状像一个长椭圆棒.椭圆棒的短轴对不同的蛋白质亚基-SDS复合物基本上是相同的(约18μm),但长轴的长度则与蛋白质量的大小成正比,因此这种复合物在SDS-PAGE系统中...
蛋白质修饰:蛋白质二级结构预测-基于氨基酸疏水性的预测方法
20种氨基酸的疏水参数见下表:(高正值的氨基酸具有更大的疏水性,而低负值的氨基酸则更加亲水):...
Native-PAGE:Native gel electrophoresis
(1)取2支试管分别加入蛋白质溶液和甘氨酸溶液1毫升,再各加0.5毫升0.1%茚三酮溶液,混匀,在沸水浴中加热1—2分钟,观察颜色是否由粉红色 变紫红色再变蓝色....
蛋白质含量测定:蛋白质及氨基酸的颜色反应
(1)取2支试管分别加入蛋白质溶液和甘氨酸溶液1毫升,再各加0.5毫升0.1%茚三酮溶液,混匀,在沸水浴中加热1—2分钟,观察颜色是否由粉红色 变紫红色再变蓝色....
蛋白质含量测定:紫外分光光度法测定蛋白质含量
牛血清蛋白标准溶液(1000ug/ml)的制备 称取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中,加入超纯水溶解并定容....
SDS-PAGE:SDS-PAGE注意事项
2. 用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对量时,必须同时作标准曲线.不能利用这次的标准曲线作为下次用.并且SDS-PAGE测定量有10%误差,不可完全信任....
Nature:NLGN3蛋白缺乏可高分级神经胶质瘤生长
期刊上,论文标题为“Targeting neuronal activity-regulated neuroligin-3 dependency in high-grade glioma”。...
原创简析金属螯合亲和层析的应用进展
固定化金属螯合亲和层析在生物纯化方面具有很多优点:(1)与蛋白结合力强、容量大,可用于工业生产;(2)洗脱条件温和,纯化过程不会改变靶蛋白的功能活性;(3)使用寿命长,通过清洗-再生可以长期反复使用;(4)选择性多,根据实际情况筛选最适宜的分离纯化条件(选择不同的纯化介质或螯合不同的过渡金属离子)。...