免疫检测分析：ELISA检测结果准确可靠的必要条件
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是ELISA检测结果准确可靠的必要条件.ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点.本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,严格遵照操作,必能得出准确的结果....
免疫荧光：过碘酸雪夫氏染色（PAS染色）
过碘酸雪夫氏染色(periodic acid-schiff stain,PAS染色)：过碘酸是一种氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1.2乙二醇基使之变为二醛,醛与Schiff氏试剂结合,形成红色的取代...
实验动物基本操作：常见实验动物的急救措施
可以静脉注射0.1%肾上腺素1ml,必要时直接作心脏内注射.肾上腺素具有增强心肌收缩力,使心肌收缩幅度增大与加速房室传导速度、扩张冠状动脉、增强心肌供血、供氧及改肌代谢、刺激高位及低位心脏起搏点等作用....
实验技能SOP：C6鼠脑胶质瘤模型的建立SOP
将SD大鼠以10%水合氯醛0.3ml/100g (300mg/kg)腹腔注射麻醉后固定于立体定向头架,将1.0×106细胞悬液10μl以微量注射器注射于小鼠右侧尾状核(手术颅骨标志，以牙钻...
蛋白分离纯化：吸附层析法（AdsorptionChromatography）
层析用硅胶为一多孔性物质,中具有硅氧烷的交链结构,同时在颗粒表面又有很多硅醇基.硅胶吸附作用的强弱与硅醇基的含量多少有关.硅醇基能够通过氢键的形成而吸附水分,因此硅胶的吸附力随吸着的水分增加而降低.若吸水量超过17%,吸附力极弱不能用作为吸附剂,但可作为分配层析中的支持剂.对硅胶的活化,当硅胶加热至100～110℃时,硅胶表面因氢键所吸附的水分即能被除去.当温度升高至500℃时,硅胶表面的硅醇基也能脱水缩台转变为硅氧烷键,从而了因氢键吸附水分的活往,就不再有吸附剂的性质,虽用水处理亦不能恢复其吸附活性...
基础知识：蛋白质空间结构
蛋白质的生物学功能在很大程度上取决于其空间结构,蛋白质结构构象多样性导致了不同的生物学功能.蛋白质结构与功能关系研究是进行蛋白质功能预测及蛋白质设计的基础.蛋白质只有处于它自己特定的三维空间结构情况下,才能获得它特定的生物活性;三维空间结构稍有,就很可能会导致蛋白质生物活性的降低甚至.因为它们的特定的结构允许它们结合特定的配体,例如,血红蛋白和肌红蛋白与氧的结合、酶和它的底物、激素与受体、以及抗体与抗原等.知道了基因密码,科学家们可以推演出组成某种蛋白质的氨基酸序列,却无法绘制蛋白质空间结构.因而,人...
质粒提取：质粒的提取
质粒的提取方法很多,大多包括 3 个主要步骤：细菌的培养、细菌的收集和裂解、质粒 DNA的分离和纯化.本实验以碱裂解法为例,介绍质粒的抽提过程....
质粒提取：SDS碱裂解法制备质粒DNA：大量制备
细胞的制备1、挑后的单菌落(或用0.1-1.0ml单菌落的培养物),接种到30ml含有适当抗生素的丰富培养基中(LB、YT或Terrific培养液),于37 ℃剧烈振摇下培养过夜.确保培养物通气良好：试管的体积应该至少比细菌培养液的体积大4倍.试管不宜盖紧培养物应在剧烈振摇下培养.2、在适当的温度和摇速下培养菌液直至对数生长期晚期(OD600约为0.6).3、在含有500mlLB 、YT或Terrific培养液(预热37 ℃)及适当抗生素的烧瓶(2L)中接种25ml对数生长期晚期的菌液.将此培养液在37...
抗体抗原实验：聚乙二醇(PEG)沉淀试验检测CIC
聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)是一种无电荷的直链大多糖,可非性地引起蛋白质沉淀.沉淀具有可逆性,被沉淀的蛋白质生物活性亦不受影响.不同浓度的PEG可沉淀量不同的蛋白质,在pH值、离子浓度等条件固定时,蛋白质量越大,用以沉淀的PEG浓度越小.由于PEG 6000对蛋白质沉淀具有良好的选择性,所以在IC测定中主要采用PEG 6000....
免疫荧光：藻酸盐包裹实验
4. 将第4次免疫后7天的小鼠用钠0.1ml (按100 mg/kg计) 腹腔注射麻醉,小鼠麻醉后置于解剖台上,切开背部皮肤,皮下植入4粒藻酸盐包裹颗粒,缝合皮肤,外敷手术胶膜;...
实验动物基本参数：计划生育研究中实验动物的选择
长期以来,对男用避孕药的研究不很重视,进展缓慢.药物能精子的生成过程;干扰男性生殖活动的激素调节;干扰副性腺和改变的理化特性,均可达到不孕的目的.常选用成年雄性大白鼠,如观察药物对大鼠生殖率的影响,精子数的影响,精子活动力的影响以及对雄性激素的影响....
实验动物基础：家兔生物学特性和解剖生理特点
3.是食草类(Herbivorous)单胃动物.饲养原则是以青粗食米为主,精饲料为辅.喜欢独居,白天活动少,都处于假眠或休息状态,夜间活动大,吃食多.有啃木、扒土的习惯....
蛋白表达：新颖的融合蛋白表达系统
通常,两个基因之间的融合表达能更快地解决这些问题.在这种方式中,目的基因被引入某个高表达蛋白序列(fusion tag)的3’末端,比如大肠杆菌的一段序列,或者任一可在大肠杆菌中高度表达的基因,它提供良好表达所必需的信号,而表达出的融合蛋白的N末端含有由 fusion tag编码的片段.fusion tag所编码的可能是整个功能蛋白或是其中的部分.比如6x His Tag、β-半乳糖苷酶融合蛋白和trpE融合蛋白、谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白以及硫氧还蛋白(Trx)融合蛋白等...
蛋白质含量测定：蛋白质浓度测定
蛋白质溶液浓度测定方法有多种,下述几种方法可供选用.蛋白质浓度的测定,往往用于计算纯化方法的回收率的重要方法....
Nature：科学家首次RNA表观修饰在造血干细胞发育中的关键作用
在脊椎动物中，造血干细胞最初由特化的生血内皮通过内皮-造血（EHT）过程产生于胚胎期主动脉-性腺-中肾区，随后向胎肝（小鼠和人）或尾部造血组织（斑马鱼）迁移并进行扩增，向胸腺迁移以便发育为淋系细胞，最后，向骨髓（小鼠和人）或肾髓（斑马鱼）迁移以维持终生造血。经过几十年的研究与探索，科学家对于造血干细胞的体内发育和体外分化已有了基本了解，但对整个过程的动态调控机制的认识仍不完善，尤其对于表观遗传修饰在脊椎动物造血干细胞发育过程中的作用更是知之甚少。...